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考馬斯亮藍(lán)g-250染色法測(cè)定蛋白質(zhì)含量與其他方法相比有什么優(yōu)缺點(diǎn)

蛋白質(zhì)的存在影響酸堿滴定中所用某些指示劑的顏色變化，從而改變這些染料的光吸收。在些基礎(chǔ)上發(fā)展了蛋白質(zhì)染色測(cè)定方法。涉及的指示劑有甲ji橙、考馬斯亮藍(lán)、xiu甲fen綠和xiu ?jia酚紫。目前廣泛使用的染料是考馬斯亮藍(lán)。

考馬斯亮藍(lán)G-250在酸性溶液中為棕紅色，當(dāng)它與蛋白質(zhì)通過范德華鍵結(jié)合后，變?yōu)樗{(lán)色，食用藍(lán)色1號(hào)生產(chǎn)廠家，且在蛋白質(zhì)一定濃度范圍內(nèi)符合比爾定律，可在595nm處比色測(cè)定。2—5分鐘即呈da光吸收，食用藍(lán)色1號(hào)批發(fā)，至少穩(wěn)定1小時(shí)。在0.01—1.0 mg蛋白質(zhì)/ml范圍內(nèi)均可。該法操作簡(jiǎn)便迅速，消耗樣品量少，但不同蛋白質(zhì)之間差異大，且標(biāo)準(zhǔn)曲線線性差。高濃度的Tris、EDTA、尿素、甘油、蔗糖、bing酮、硫酸銨和去污劑時(shí)測(cè)定有干擾。緩沖液濃度過高時(shí)，改變測(cè)定液pH值會(huì)影響顯色?？捡R斯亮藍(lán)染色能力強(qiáng)，比色杯不洗干凈會(huì)影響光吸收值，不可用石英懷測(cè)定

保存期為5年《食用添加劑應(yīng)用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》（GB2760-1996）中要求：亮藍(lán)可用于果味型飲料（液、固態(tài)）、水果汁型飲料、碳酸飲料、配制酒、糖塊、點(diǎn)心上彩裝、紅綠絲、水果罐頭、濃縮汁、青梅、對(duì)蝦片，使用量為0.025g/kg；冰激凌，使用量為0.021999g/kg。紅綠絲的使用量可翻倍；果味粉添加劑添加量按稀釋液倍率的50%添加【使用說明】將規(guī)范稱重的本產(chǎn)品放置器皿中，慢慢添加適量溫開水，并持續(xù)拌和使之融解，個(gè)人所得水溶液就可以用于上色。應(yīng)用全過程中應(yīng)留意盡量減少或降低酸、堿、y化劑、氧化劑、金屬材料電離、微生物等化學(xué)物質(zhì)的影響，并留意防止受高溫與曝曬，上海食用藍(lán)色1號(hào)，防止退色或變色。

使用量：一般為0.025g/kg。

.使用方法：將準(zhǔn)確稱量的本品置于容器中，逐漸加入適量溫水，并不斷攪拌使之完全溶解，所得溶液即可用于著色。

使用過程中應(yīng)注意避免或減少酸、減、氧化計(jì)、還原計(jì)、金屬離子、微生物等物質(zhì)的不良影響，并注意免受高溫與暴曬，以防褪色或變色。

復(fù)合著色劑的使用：根據(jù)需要，可將本品與本公司生產(chǎn)的其它色澤的著色劑按適當(dāng)比例配置各種不同的顏色。

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