湖北植物組織原位雜交-武漢貝科新肽(圖)
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武漢貝科新肽科技有限公司
- 主營業(yè)務(wù):原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
- 公司官網(wǎng):bkxtbio.com.cn
- 公司地址:湖北省武漢市洪山區(qū)關(guān)山大道289號紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號
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15002786799
(夏先生 先生)
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根據(jù)核酸探針標記物的種類分別進行自顯影或利用酶檢測系統(tǒng)進行不同顯色處理。細胞或組織的原位雜交切片在顯示后均可進行半定量的測定,如自顯影可利用人工或計算機輔助的圖象分析檢測儀(computer-assisted image analysis)檢測銀粒的數(shù)量和分布的差異。非性核酸探針雜交的細胞或組織可利用酶檢測系統(tǒng)顯色,然后利用顯微分光光度計或圖像分析儀對不同類型和數(shù)量的核酸的顯色強度進行檢測。

雜交 (1) 盛有2×SSC的塑料盤同,將干烤的濾膜飄浮在液面上,浸濕5分鐘。(2) 將濾膜轉(zhuǎn)到200ml預(yù)洗液的玻璃皿中。濾膜何疊在一起,放于溶液中。用保鮮膜蓋住玻璃皿,放到位于培養(yǎng)箱內(nèi)的旋轉(zhuǎn)平臺上。于50℃處理30分鐘。在這一步及以后的所有步驟中,應(yīng)緩緩搖動濾膜,防止它們粘在一起。(3) 用泡過預(yù)洗液的吸水棉紙輕輕地從膜表面拭去細菌碎片,植物組織原位雜交,以降低雜交背景而不影響陽性雜交信號的強度和清晰度。(4) 將濾膜轉(zhuǎn)到盛有150ml預(yù)雜交液的玻璃中,在適宜溫度(即在水溶液中雜交時用68℃,而在50%甲酰胺中雜交時用42℃)下,預(yù)雜交1-2小時。

預(yù)雜交
1)每個管中置換成大約300ulHYB-溶液,60℃水浴5分鐘,避免振蕩。
2)用等體積的HYB+取代HYB-。
3)60℃水浴,預(yù)雜交4小時以上。
雜交
1)吸去預(yù)雜交的HYB+,加上100ul已加入探針的HYB+溶液(探針濃度約為1ng/ul)..
2)60℃ 溫浴過夜。
注:雜交與預(yù)雜交的溫度可以是55到60度不等,溫度越低,探針結(jié)合越好,溫度越高,背景越小。

湖北植物組織原位雜交-武漢貝科新肽(圖)由武漢貝科新肽科技有限公司提供。武漢貝科新肽科技有限公司位于湖北省武漢市洪山區(qū)關(guān)山大道289號紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號。在市場經(jīng)濟的浪潮中拼博和發(fā)展,目前貝科新肽在化學試劑中享有良好的聲譽。貝科新肽取得全網(wǎng)商盟認證,標志著我們的服務(wù)和管理水平達到了一個新的高度。貝科新肽全體員工愿與各界有識之士共同發(fā)展,共創(chuàng)美好未來。
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