將32 P標記的雙鏈DNA探針于100℃加熱5分鐘,迅速置于冰浴中。單鏈探針不必變性。將探針加到雜交袋中雜交過夜。雜交期間,盛濾膜的容器應(yīng)蓋嚴,以防液體蒸發(fā)。
雜交結(jié)束后,去除雜交液,立即于室溫把濾膜放入大體積(300-500ml)的2×SSC和0.1% SDS溶液中,輕輕振搖5分鐘,并將濾膜至少翻轉(zhuǎn)一次。重復(fù)洗 一次,同時應(yīng)避免膜干涸。
68℃用300-500ml 1×SSC和0.1% SDS溶液洗膜兩次,每次1-1.5小時。此時已可進行自顯影。如背景很高或?qū)嶒炓髧栏竦南茨l件,可用300-500ml 0.2×SSC和0.1% SDS的溶液于68℃將濾膜浸泡60分鐘。
原位雜交雜交液
(一)雜交液內(nèi)除含一定濃度的標記探針外,還含有較高濃度的鹽類、甲酰胺、硫酸葡聚糖、牛白蛋白及載體DNA或RNA等。
(二)雜交液中含有較高濃度的Na+可使雜交率增加,可以減低探針與組織標本之間的靜電結(jié)合。
(三)賈酰胺可使雜交溫度降低,動物組織原位雜交,所以雜交液中加入適量的甲酰胺,可避免因雜交溫度過高而引起的組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的破壞以及標本的脫落。
(四)硫酸葡聚糖能與水結(jié)合,從而減少雜交液的有效容積,提高探針有效濃度,以達到提高雜交率的目的。
原位雜交的基本原理是利用標記的核酸探針與細胞或組織中的DNA或RNA進行雜交,然后通過檢測標記來識別探針的位置。這使得研究人員能夠在細胞或組織中確定特定基因或基因組區(qū)域的位置和表達水平。
原位雜交可以用于多種類型的實驗。例如,它可以用來檢測特定基因在發(fā)育過程中的表達模式,或者確定特定基因變異在細胞中的分布。此外,原位雜交還可以用于診斷疾病,例如某些類型的,以及監(jiān)測效果。
溫馨提示:以上是關(guān)于動物組織原位雜交-貝科新肽科技公司的詳細介紹,產(chǎn)品由武漢貝科新肽科技有限公司為您提供,如果您對武漢貝科新肽科技有限公司產(chǎn)品信息感興趣可以聯(lián)系供應(yīng)商或者讓供應(yīng)商主動聯(lián)系您 ,您也可以查看更多與化學(xué)試劑相關(guān)的產(chǎn)品!
免責聲明:以上信息由會員自行提供,內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由發(fā)布會員負責,天助網(wǎng)對此不承擔任何責任。天助網(wǎng)不涉及用戶間因交易而產(chǎn)生的法律關(guān)系及法律糾紛, 糾紛由您自行協(xié)商解決。
風險提醒:本網(wǎng)站僅作為用戶尋找交易對象,就貨物和服務(wù)的交易進行協(xié)商,以及獲取各類與貿(mào)易相關(guān)的服務(wù)信息的平臺。為避免產(chǎn)生購買風險,建議您在購買相關(guān)產(chǎn)品前務(wù)必 確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。過低的價格、夸張的描述、私人銀行賬戶等都有可能是虛假信息,請采購商謹慎對待,謹防欺詐,對于任何付款行為請您慎重抉擇!如您遇到欺詐 等不誠信行為,請您立即與天助網(wǎng)聯(lián)系,如查證屬實,天助網(wǎng)會對該企業(yè)商鋪做注銷處理,但天助網(wǎng)不對您因此造成的損失承擔責任!
聯(lián)系:tousu@tz1288.com是處理侵權(quán)投訴的專用郵箱,在您的合法權(quán)益受到侵害時,歡迎您向該郵箱發(fā)送郵件,我們會在3個工作日內(nèi)給您答復(fù),感謝您對我們的關(guān)注與支持!