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科銳諾生物(多圖)-分子病理技術(shù)服務(wù)

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分子病理學(xué)是與分子生物學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)等學(xué)科相互滲透，在蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子水平上研究疾病病因、發(fā)病機(jī)制、形態(tài)變化及功能損害等方面發(fā)生和發(fā)展規(guī)律的新的分支學(xué)科，對(duì)疾病的病因、發(fā)展、發(fā)病機(jī)制及形態(tài)變化，從傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)概念深入至分子或基因水平，分子病理已成為腫1瘤病理研究中重要的內(nèi)容和手段。①細(xì)胞特異性mRNA轉(zhuǎn)錄的定位，可用于基因圖譜，基因表達(dá)和基因組進(jìn)化的研究；

原位雜交是在分子生物學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用極為廣泛的實(shí)驗(yàn)技術(shù)之一，是在研究生物體發(fā)育過(guò)程中的一種極為重要的分子遺傳學(xué)的研究方法。其英文名為insitu hybridization，其中in situ為拉丁文，字面的意思理解就是說(shuō)在其原來(lái)的天然的位置處雜交。用已標(biāo)記的核酸探針與組織切片或細(xì)胞中的待測(cè)核酸中的互補(bǔ)序列雜交， 從而對(duì)組織細(xì)胞中的核酸進(jìn)行定性、定位和相對(duì)定量分析。是一種直接、簡(jiǎn)便的研究基因定位和表達(dá)的方法。基本原理--堿基互補(bǔ)配對(duì)原理

既要充分保留被測(cè)核酸，（特別是RNA）不被降解，又要盡可能維持原有組織或細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)。

步驟：基本與免1疫組織化學(xué)技術(shù)相似，即組織要求新鮮和迅速投入固定液。固定液為4%多聚甲醛/0.1 M PBS（PH7.0-7.6），含有1/1000 DEPC。標(biāo)本較大時(shí)用刀片切成厚度不超過(guò)4mm的小塊，分子病理技術(shù)服務(wù)，固定1小時(shí)即可，較大的標(biāo)本固定不要超過(guò)2小時(shí)。某些組織對(duì)過(guò)度固定尤其敏感，如動(dòng)物大腦，固定時(shí)間30-40分鐘，一般不要超過(guò)1小時(shí)。取材過(guò)程中避免手指、唾液和未經(jīng)RNA酶抑制處理的器具接觸標(biāo)本。冷凍切片以厚5~30um佳，40℃烤箱內(nèi)干燥2小時(shí)后儲(chǔ)存在-80℃超低溫冰箱，在-20℃可保存２～３周，在-70℃可保存數(shù)月之久。

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