原位雜交-動(dòng)物組織原位雜交-貝科新肽(推薦商家)

詢盤留言 |投訴|申領(lǐng)|刪除 產(chǎn)品編號(hào)：590949051 更新時(shí)間：2025-01-23

武漢貝科新肽科技有限公司

主營(yíng)業(yè)務(wù)：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
公司官網(wǎng)：bkxtbio.com.cn
公司地址：湖北省武漢市洪山區(qū)關(guān)山大道289號(hào)紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號(hào)

業(yè)務(wù)熱線： 15002786799 (夏先生先生)

產(chǎn)品詳情
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價(jià)格說明 : 議定
包裝說明 : 不限
物流說明 : 貨運(yùn)及物流
交貨說明 : 按訂單

熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization，植物組織原位雜交，F(xiàn)ISH)技術(shù)是在已有的性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非性DNA分子原位雜交技術(shù)。它利用熒光標(biāo)記的核酸片段為探針，與染色體上或DNA顯微切片上的特異fl-N：~行雜交，原位雜交，通過熒光檢測(cè)系統(tǒng)(熒光顯微鏡)檢測(cè)信號(hào)DNA序列在染色體或DNA顯微切片上的目的DNA序列，進(jìn)而確定其雜交位點(diǎn)。FISH技術(shù)檢測(cè)時(shí)間短，檢測(cè)靈敏度高，無污染，已廣泛應(yīng)用于染色體的鑒定、基因定位和異常染色體檢測(cè)等領(lǐng)域。

一. 原位雜交天

1. 重新水化和固定

1）吸取固定好的胚胎，加入50%的PBST溶液，原位雜交技術(shù)，放置5分鐘。

2）置換成30％的PBST溶液，放置5分鐘

3）置換成PBST溶液，放置5分鐘，重復(fù)一次

4）置換成4％多聚甲醛的PBS溶液固定20分鐘

5）用PBST洗兩次，每次放置五分鐘，室溫。

蛋白酶處理與后固定（本實(shí)驗(yàn)不做此步）

1）用10ul/ml的蛋白酶K在室溫下處理胚胎。5體節(jié)以下的胚胎不處理，5體節(jié)到24小時(shí)的胚胎處理3分鐘，24小時(shí)以上的胚胎處理5分鐘或者更長(zhǎng)。發(fā)育時(shí)間越短的胚胎越嫩，可以不用或者少用蛋白酶處理，發(fā)育時(shí)間長(zhǎng)的胚胎就需要用蛋白酶來疏松組織，以便于雜交。

2）用PBST溶液輕洗，在PBST中放置5分鐘。

3）用4％多聚甲醛的PBS溶液固定20分鐘，室溫。

4）用PBST洗兩次，每次放置五分鐘，室溫。

組織原位雜交(Tissue in situ hybridization），即原位雜交組織化學(xué)技術(shù)和原位雜交細(xì)胞化學(xué)技術(shù)

原位雜交技術(shù)的基本原理

利用核酸分子單鏈之間有互補(bǔ)的堿基順序，通過堿基對(duì)之間非共價(jià)鍵的形成，出現(xiàn)穩(wěn)定的雙鏈區(qū)，形成雜交的雙鏈。

1.兩條核苷酸單鏈片段，在適宜的條件下，通過氫鍵結(jié)合，形成DNA-DNA、DNA一RNA或RNA一RNA雙鍵分子

2.應(yīng)用帶有標(biāo)記的（有性同位素，如3H、35S、32P，熒光素、生物素、等非性物質(zhì))DNA或RNA片段作為核酸探針，與組織切片或細(xì)胞內(nèi)待測(cè)核酸(RNA或DNA）片段進(jìn)行雜交

3.用自顯影等方法予以顯示，在光鏡或電鏡下觀察目的mRNA或DNA的存在與定位

用原位雜交術(shù)，可在原位研究細(xì)胞合成某種多肽或蛋白質(zhì)的基因表達(dá)。

此方法有很高的敏感性和特異性，可進(jìn)一步從分子水來探討細(xì)胞的功能表達(dá)及其調(diào)節(jié)機(jī)制。已成為當(dāng)今細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)研究的重要手段。

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