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原位雜交(In Situ Hybridization)是指將特定標(biāo)記的已知核酸序列為探針與細(xì)胞或組織切片中核酸進(jìn)行雜交,從而對(duì)特定核酸序列進(jìn)行定量定位的過(guò)程。這個(gè)技術(shù)可以用于研究細(xì)胞或組織中特定基因或DNA序列的表達(dá)和定位,從而幫助研究者深入理解和探究生物學(xué)過(guò)程。原位雜交有幾種不同的類(lèi)型,包括熒光原位雜交和其他用于基因表達(dá)分析的方法。

原位雜交(In situ hybridazation)

固定

收集斑馬魚(yú)的胚胎,在Holfretor水中培養(yǎng),染色體原位雜交,到達(dá)所需要的發(fā)育時(shí)期時(shí),用蛋白酶去除卵膜,用4%多聚甲醛固定,在4℃保存,二十四小時(shí)后用50%2%多聚甲醛溶液洗,然后換成,在-20C 保存,待用(兩天和兩天以上的胚胎需要用處理,去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培養(yǎng),可阻斷色素的形成)

原位雜交技術(shù)(In situ hybridization,ISH)是分子生物學(xué)、組織化學(xué)及細(xì)胞學(xué)相結(jié)合而產(chǎn)生的一門(mén)新興技術(shù),始于20世紀(jì)60年代。1969年美國(guó)耶魯大學(xué)的Gall等(1969)首先用爪蟾核糖體基因探針與其卵母細(xì)胞雜交,將該基因進(jìn)行定位,與此同時(shí)Buongiorno—Nardelli和Amaldi等(1970)相繼利用同位素標(biāo)記核酸探針進(jìn)行了細(xì)胞或組織的基因定位,從而創(chuàng)造了原位雜交技術(shù)。自此以后,由于分子生物學(xué)技術(shù)的迅猛發(fā)展,特別是20世紀(jì)70年代末到80年代初,分子、質(zhì)粒和噬菌體DNA的構(gòu)建成功,為原位雜交技術(shù)的發(fā)展奠定了深厚的技術(shù)基礎(chǔ)。

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