染色體原位雜交-貝科新肽(在線咨詢)-原位雜交

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武漢貝科新肽科技有限公司

主營業(yè)務(wù)：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
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公司地址：湖北省武漢市洪山區(qū)關(guān)山大道289號紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號

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根據(jù)核酸探針標(biāo)記物的種類分別進(jìn)行自顯影或利用酶檢測系統(tǒng)進(jìn)行不同顯色處理。細(xì)胞或組織的原位雜交切片在顯示后均可進(jìn)行半定量的測定，如自顯影可利用人工或計算機(jī)輔助的圖象分析檢測儀（computer-assisted image analysis）檢測銀粒的數(shù)量和分布的差異。非性核酸探針雜交的細(xì)胞或組織可利用酶檢測系統(tǒng)顯色，然后利用顯微分光光度計或圖像分析儀對不同類型和數(shù)量的核酸的顯色強(qiáng)度進(jìn)行檢測。

在ISHH，整個實(shí)驗(yàn)周期是比較長的，植物原位雜交，實(shí)驗(yàn)程序也比較繁雜，而雜交在ISHH整個實(shí)驗(yàn)中可被認(rèn)為是“短兵相接”的一步。雜交前的一切準(zhǔn)備工作如增加組織通透性都是為了在雜交這一步驟中核酸探針能進(jìn)入細(xì)胞或組織與其內(nèi)的靶核苷酸相結(jié)合。因此，雜交是ISHH中關(guān)鍵的而且是重要的一個環(huán)節(jié)。雜交是將雜交液滴于切片組織上，原位雜交，加蓋硅化的蓋玻片，熒光原位雜交，防止孵育過程中的高溫（50℃左右）導(dǎo)致雜交液的蒸發(fā)。為保證雜交所需的濕潤環(huán)境，可將其放在盛有少量5×SSC或2×SSC（standard saline citrate， SSC）溶液的硬塑料盒中進(jìn)行孵育。雜交液的成分和預(yù)雜交液基本相同，所不同的是加入了標(biāo)記的核酸探針和硫酸葡聚糖。

原位雜交技術(shù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果

原位雜交技術(shù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果包括陽性信號和陰性信號的判斷標(biāo)準(zhǔn)。陽性信號是指探針與目標(biāo)核酸序列特異性結(jié)合形成的雙鏈復(fù)合物，在顯色反應(yīng)、熒光染色或性同位素標(biāo)記下呈現(xiàn)出明顯的信號。陰性信號是指探針未與目標(biāo)核酸序列結(jié)合，不呈現(xiàn)任何信號。實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析需要結(jié)合探針的特異性和敏感性、組織或細(xì)胞的原始結(jié)構(gòu)以及實(shí)驗(yàn)條件等因素綜合進(jìn)行。

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