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PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建設(shè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范
各區(qū)域的功能與設(shè)備
試劑制備區(qū)主要為擴(kuò)增試劑的準(zhǔn)備,分裝盒保存。主要設(shè)備有天平、冰箱、離心機(jī)、加樣器、紫外燈。
樣品制備區(qū)主要是樣品的混樣和測(cè)試樣品的制備。其主要設(shè)備有冰箱、生物安全柜、離心機(jī)、加樣器、振蕩器、恒溫水槽、上下水設(shè)備、廢棄物容器、紫外燈。操作臺(tái)是否使用生物安全柜、凈化工作臺(tái),或工作臺(tái),要根據(jù)樣品的性質(zhì)和制備要求來決定,如疾控中心、臨床醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室一般選擇生物安全柜,植物、檢疫等選擇柜。
擴(kuò)散區(qū)為pcr擴(kuò)增反應(yīng)系統(tǒng)的制備和模板的添加、核酸擴(kuò)增。在生物安全柜(超凈臺(tái))內(nèi)進(jìn)行加樣,超凈臺(tái)氣流方向宜選用垂直式。冰箱,生物安全柜,離心加樣裝置,廢物容器,紫外燈等。
擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)為擴(kuò)增產(chǎn)物的分析區(qū)域。如果只使用全自動(dòng)擴(kuò)增檢測(cè)儀,可將擴(kuò)增區(qū)與擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)合并為一個(gè)區(qū)。本區(qū)域所使用的儀器設(shè)備有、、加樣器和水浴箱等。
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PCR實(shí)驗(yàn)室管理細(xì)則規(guī)范:
嚴(yán)格按照“試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)→樣品標(biāo)本處理區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)”的單向進(jìn)行,不得逆向進(jìn)入前一工作區(qū)。
非本實(shí)驗(yàn)室工作人員,未經(jīng)允許不得進(jìn)入。進(jìn)修、實(shí)習(xí)或因科研活動(dòng)需要進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的人員,進(jìn)入各實(shí)驗(yàn)區(qū)前須先熟悉本程序的各項(xiàng)規(guī)定,并在本實(shí)驗(yàn)室人員監(jiān)督下,嚴(yán)格遵守執(zhí)行,
在各區(qū)域的實(shí)驗(yàn)操作過程中,操作人員必須戴手套、口罩和帽子,并嚴(yán)格遵守操作規(guī)程。
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PCR實(shí)驗(yàn)室管理細(xì)則規(guī)范:
試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)只能用于試劑的貯存和配置。
樣品和標(biāo)本處理區(qū)只能進(jìn)行臨床標(biāo)本的保存,核酸提取、保存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管,測(cè)定RNA時(shí)cDNA的合成。
擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)只能進(jìn)行DNA或cDNA擴(kuò)增,實(shí)時(shí)熒光PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的分析。
PCR實(shí)驗(yàn)危險(xiǎn)性較大,稍微不注意就可能造成事故的發(fā)生,所以在PCR實(shí)驗(yàn)室工作的人員要嚴(yán)格遵守上述規(guī)范。
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