在原位雜交過程中,需要使用標(biāo)記的核酸探針,通常是在性核素或非性物質(zhì)中標(biāo)記的。這些探針可以通過不同的方式制備,例如從已知序列的DNA或RNA制備,或者通過使用生物信息學(xué)方法設(shè)計(jì)和合成新的探針。
在進(jìn)行原位雜交時,細(xì)胞或組織需要固定在適當(dāng)?shù)闹С治锷?,例如載玻片。然后,探針與細(xì)胞或組織中的DNA或RNA進(jìn)行雜交,通常是在加熱條件下進(jìn)行的。接下來,通過洗滌和顯影步驟去除未結(jié)合的探針和信號增強(qiáng)劑,后用顯微鏡觀察雜交信號的位置。
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